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天然免疫分子TLR-2的结合短肽及其特性研究

批准号30070719 学科分类炎症、感染与免疫 ( H1005 )
项目负责人富宁 负责人职称教授 依托单位南方医科大学
资助金额15.00
万元
项目类别面上项目 研究期限2001 年 01 月 01 日 至
2003 年 12 月 31 日
中文主题词TLR-2 . 结合短肽. 分子识别
英文主题词Toll like receptor-2 . binding peptide . molecular recogniti

摘要

中文摘要 拟用重组TLR-2胞外段蛋白从噬菌体随机肽库中筛选可与其结合的短肽,并进行表达与合成环治銎溆隩LR-2相互作用的结构特点,观察其对不同微生物产物刺激的、由TLR-2介导的信糯技跋赴蜃硬挠跋臁F湟庖逶谟冢?、为阐明TLR-2的分子识别机制提供依据;2、影响TLR-2为治疗靶点的先导化合物;3、寻求建立主动免疫预防的可能性。
英文摘要
结题摘要 由于TLR2可识别多种病原微生物及其产物,已成为研究感染的重要切入点。本项目采用重组TLR2胞外段蛋白从噬菌体展示肽库中筛选可与其结合的短肽,分析该短肽结合TLR-2、并与其相互作用的结构基础;观察该短肽在结合TLR-2、影响其介导微生物及其产物诱导的细胞信号传导及细胞因子产生中的作用。目前已完成以下工作:(1)构建了人TLR2胞外段和全长的真核表达质粒,获得了稳定表达TLR2胞外段和全长的HEK293细胞;(2)纯化得到TLR2胞外段蛋白,证明人TLR2可与直接LPS结合,并在一定浓度范围内呈剂量依赖性;以TLR2胞外段蛋白为钓饵蛋白筛选噬菌体12肽库和环7肽库,获得高度保守的疏水序列,并已合成短肽;(3)人TLR2胞外段蛋白的分段表达,获得TLR2胞外段的三个小片段;(4)小鼠TLR2全基因的克隆表达,小鼠TLR2 N端截短序列的克隆表达及纯化;(5)合成小鼠TLR2表位多肽,通过四次免疫,成功获得高效价抗mTLR2多克隆抗体,并意外地发现该抗体可影响荷瘤小鼠的成瘤时间与肿瘤体积。希望以上研究能为阐明TLR2的识别机制、建立以TLR-2为靶点的预防和治疗提供理论和实验基础。

成果

序号 标题 类型 作者
1 人Toll-like receptor 2胞外段的克隆和表达 期刊 刘艳君|朱平|韩强涛|富宁|
2 广谱模式识别分子Toll like Receptor 2 的研究进展 期刊 刘艳君|富宁|
3 mTLR-2基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达 期刊 赵文忠|江海燕|刘艳君|朱 平|富 宁|
4 Toll样受体与病原相关分子模式 著作 富宁|
5 人TLR-2胞外段配基模拟肽的初步研究. 期刊 刘艳君|罗海波|朱平|富宁|

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