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有丝分裂器和胞质分裂环特异的新蛋白的鉴定及其功能研究

批准号30671057 学科分类细胞生长与分裂 ( C0702 )
负责人曾长青 职称研究员 单位名称中国科学院北京基因组研究所
资助金额 30万元 项目类别 面上项目 起止年月 2007年01月01日 至 2009年12月31日
主题词 NuMA;CDCA4;RNAi;Pull down assay;Isoform
附注说明 本研究挑选具有细胞周期依赖性染色的自身免疫病人抗体进行Hela细胞cDNA文库筛选,鉴定出一个与经典细胞核有丝分裂器蛋白NuMA定位相似的细胞核微管结合蛋白CDCA4(cell division cycle associated 4)。在此基础上,课题组将研究重心分为两个方向。一方面同时也是重点是通过制备抗体,确认了CDCA4间期在细胞核内有富集、分裂期定位于纺锤极上的周期特异性分布;RNAi、过表达等试验结果表明该蛋白为一个抑制细胞生长的调控因子,在细胞分裂期发挥着重要的调节作用;同时通过pull down及Co-IP试验,寻找并鉴定了一个新的CDCA4相互作用蛋白。在此同时,继续研究NuMA在细胞分裂调控方面的作用。通过GST Pull Down Assay 寻找出一系列NuMA相互作用候选蛋白,并确定了NuMA的isoform。

成果

序号 课题 类型 参与人
0 The Spindle function of CDCA4 期刊 王利敏,朱贵欣,杨栋,李倩怡,李永哲,何大澄,曾长青

摘要

结题摘要 本研究挑选具有细胞周期依赖性染色的自身免疫病人抗体进行Hela细胞cDNA文库筛选,鉴定出一个与经典细胞核有丝分裂器蛋白NuMA定位相似的细胞核微管结合蛋白CDCA4(cell division cycle associated 4)。在此基础上,课题组将研究重心分为两个方向。一方面同时也是重点是通过制备抗体,确认了CDCA4间期在细胞核内有富集、分裂期定位于纺锤极上的周期特异性分布;RNAi、过表达等试验结果表明该蛋白为一个抑制细胞生长的调控因子,在细胞分裂期发挥着重要的调节作用;同时通过pull down及Co-IP试验,寻找并鉴定了一个新的CDCA4相互作用蛋白。在此同时,继续研究NuMA在细胞分裂调控方面的作用。通过GST Pull Down Assay 寻找出一系列NuMA相互作用候选蛋白,并确定了NuMA的isoform。

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