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戊肝病毒受体的克隆和分析

批准号30570929 学科分类细胞、亚细胞结构与功能 ( C0701 )
负责人井申荣 职称教授 单位名称昆明理工大学
资助金额 7万元 项目类别 面上项目 起止年月 2006年01月01日 至 2006年12月31日
主题词 戊型肝炎病毒;受体候选蛋白;亲和层析;ELISA竞争法和阻断
附注说明 病毒的细胞受体是病毒进入细胞、实现感染和繁殖的门户,病毒与细胞间的相互作用是通过受体实现的,是细胞乃至组织、机体发生病变的第一步。戊型肝炎病毒(HEV)受体迄今尚未见报道。本项目将HEV衣壳蛋白ORF2-6HIS和易感细胞KMB17的膜蛋白混合,经亲和层析钓取受体候选蛋白,测定其N末端的氨基酸序列;通过简并性引物和RT-PCR克隆受体候选蛋白的基因序列,在鼠细胞NIH3T3中表达候选受体蛋白,通过

成果

序号 课题 类型 参与人
0 戊型肝炎病毒ORF3及其蛋白的研究 期刊 李豪,井申荣

摘要

结题摘要 戊型肝炎病毒(hepatitis E virus, HEV)是引起人体肝炎的重要病原体,严重威胁着人类的生命和健康,目前还没有特效的治疗手段,因此研究HEV的感染机制对于治疗和预防尤为重要。HEV的细胞受体是病毒感染人体的门户,克隆和分析HEV受体对于深入了解HEV感染的机制有重要的意义。本研究通过HEV ORF-6HIS从KMB17细胞中钓取HEV的受体候选蛋白,并对N端进行了测序,检索数据库,合成引物,通过RT-PCR获得受体候选蛋白的基因序列,并在大肠杆菌中表达、纯化了受体候选蛋白,免疫动物制备了抗受体候选蛋白的多克隆抗体,经过ELISA竞争法和阻断法对受体候选蛋白进行了鉴定,并且获得了初步的分析结果。

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