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兔正常胚与克隆胚发育相关基因差异表达分析及其克隆鉴定

批准号30570922 学科分类细胞生物学 ( C07 )
负责人李文雍 职称教授 单位名称阜阳师范学院
资助金额 10万元 项目类别 面上项目 起止年月 2006年01月01日 至 2006年12月31日
主题词 植入前胚胎;克隆;DDRT-PCR;IFRG基因
附注说明 近年来,克隆技术发展迅速,其应用前景也更加广阔,但克隆效率低、克隆动物发育异常等问题严重地阻碍了克隆技术的发展和应用,研究克隆动物发育的分子机理是解决这一问题的关键。本研究在建立了单个植入前胚胎mRNA差异显示技术体系的基础上,以兔植入前各期胚胎和各期克隆胚胎为材料,用优化的3对锚定引物,对不同发育时期的植入前胚胎、不同发育时期的克隆胚胎以及相同发育时期的正常胚胎和克隆胚胎分别进行mRNA差异显

成果

序号 课题 类型 参与人
0 影响体细胞核移植重构胚发育的因 期刊 李东伟,张苗苗,李文雍*
1 转录因子Oct4、Sox2和Nanog在早 期刊 李东伟,李文雍*
2 Different expression of lipoca 期刊 De-Yu Chen*,Sheng-Jie Liu,M
3 干扰素α基因的克隆及在兔早期胚 期刊 齐冰,何新,李文雍,陈清轩*

摘要

结题摘要 在仅仅一年的预研究中,全力以赴,分秒必争,很好的完成了我们主持的第一个国家自然科学基金项目,取得了阶段性进展和有价值的结果。常规mRNA差异显示技术的基础上建立了单个植入前胚胎的DDRT-PCR技术,应用该技术对兔正常发育的囊胚和克隆囊胚中mRNA的表达模式进行比较,从所有的差异表达的条带中筛选鉴定出一个阳性差异片段,并进行了深入地研究。首次在兔卵巢中克隆了该基因,经同源性检索该基因为IFRG(IFN-α应答基因),以IFRG的cDNA序列为基础设计探针对该基因在兔植入前各期胚胎和克隆胚胎中的表达进行RT-PCR分析,发现IFRG在正常植入前各期胚胎均有表达,而在克隆胚胎中仅表达到桑椹胚,在囊胚中几乎不表达。同时,设计了RNAi实验对IFRG基因在兔植入前胚胎中的功能进行了初步研究,结果表明IFRG是一个控制卵裂的抑制性基因,该研究为进一步了解IFRG在兔胚胎植入中的作用以及对克隆胚植入的影响奠定了基础。

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