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种间核质重构胚(2N)-4N聚合胚着床潜力的研究

批准号30570919 学科分类细胞生物学 ( C07 )
负责人成国祥 职称教授 单位名称同济大学
资助金额 24万元 项目类别 01 起止年月 2006年01月01日 至 2008年12月31日
主题词 种间核移植重构胚;2N-4N聚合胚;着床;
附注说明 本研究是2004年国家自然基金小额资助项目"山羊卵母细胞胞质对异种核发育调控能力的研究"已取得较好结果的后续研究项目,拟采用山羊卵母细胞胞质与不同种动物的体细胞构建的种间核移植重构胚(二倍体;2N)与山羊的四倍体胚胎(4N)组合成种间2N-4N聚合胚,并将2N-4N胚胎移植到山羊子宫内,来研究种间克隆胚胎在山羊子宫内着床的可能性。由此提供一条可能解决种间核移植重构胚着床问题的技术径路。对种间核移植重构胚中发生的核质相互作用、2N-4N聚合胚中2N与4N胚胎细胞间的相互关系以及2N-4N聚合胚与母体内膜子宫组织细胞间的相互作用等重要基础生物学问题的探讨,可能有助于揭示种间重构胚着床能力提高的机制。

成果

序号 课题 类型 参与人
0 山羊MII期卵母细胞胞质支持异种间克隆胚的着床前发育(英文) 期刊

摘要

结题摘要 本试验以山羊四倍体胚胎来营救塔尔羊异种重构胚的胚外组织,以期提高其着床与着床后的发育能力。研究结果表明,经长期培养的塔尔羊成纤维细胞具有良好的形态和正常的染色体核型,该细胞与去核的奶山羊卵母细胞组建的NT胚胎体内培养的囊胚发育率明显高于体外培养组,经Y染色体核型与SRY基因扩增分析结果表明,异种NT胚的遗传物质来自雄性塔尔羊细胞,其线粒体以奶山羊线粒体为主,塔尔羊线粒体少量存在(<0.1%);55枚异种NT囊胚移入17只奶山羊受体,30日龄的妊娠率为17.65%,45日龄时全部丧失妊娠。奶山羊四倍体胚胎的囊胚率达到45.16%,但细胞数二倍体囊胚的一半,四倍体囊胚能在受体子宫内着床,胎儿发育异常,但胎膜发育正常。将异种NT胚、异种NT胚与奶山羊四倍体胚聚合,5天后发育至囊胚;或将异种NT胚内细胞团细胞注射四倍体囊胚腔内再移植到奶山羊受体内,均能够着床,并形成胎膜与胎儿。

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